即使是填充良好的色谱柱，在多次循环的长期使用过程中也会损失部分效率，尤其是在使用杂质含量较高的样品时。如果您的色谱柱用于合成肽或重组肽的纯化，或者在最坏的情况下用于聚集肽和纤维肽的纯化，色谱柱的性能会迅速下降。
第一个警告信号通常是色谱柱背压升高。峰形恶化或理论板数下降可能是另一个信号，表明您需要清理色谱柱硅胶床入口侧堆积的纤维肽。
实用技巧：反向流动进行清洗步骤。您不希望垃圾通过色谱柱！
固定相是一项昂贵的投资，如何才能延长其使用寿命，或对性能开始下降的填料柱进行再生？
作为第一步，用 90 - 100 % 的有机溶剂清洗色谱柱是绝对无害的，而且这个简单的步骤通常会有所帮助！实用小贴士：反向流动进行清洗步骤。不要让垃圾通过色谱柱！
再生时应使用什么溶剂？
肽通常通过多种相互作用与二氧化硅发生作用：疏水作用、亲硅静电作用、氢键等。因此，抑制所有相互作用对于色谱柱的成功再生至关重要。
尿素、氢氧化铵和三羟甲基氨基甲烷是众所周知的抑制肽相互作用的药剂。Tris
（10 毫摩尔，pH = 9-10）是防止多肽聚集和溶解多肽的极佳制剂。当然，pH 值对抑制和溶解也有很大影响。适当的 pH 值很难预测，主要取决于多肽的等电点。
一般来说，需要 50-60% 左右的有机溶剂来抑制疏水作用，还需要阳离子（如铵、钠、胺）来抑制亲硅作用。
这是使锁定的杂质发生降解的关键；聚合体的脱离与有机溶剂的解吸作用相结合，带走了脱离的肽纤维碎片。这是成功清洗色谱柱所必需的 "双重作用"，有助于延长色谱柱的使用寿命。
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