Technische Hinweise - Seite 2

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Ungefähre Packungsdichte für DAISOGEL Silicagel in loser Schüttung.

Während wir vorgepackte Säulen für den analytischen und den Vorbereitungsmaßstab anbieten, ist DAISOGEL Kieselgel in loser Schüttung vor allem dafür bekannt, dass es in Kilogramm-Mengen für Aufreinigungen im größeren Maßstab erhältlich ist. In solchen Fällen empfehlen wir, Ihr Kieselgel in eine DAC-Säule (Dynamic Axial Compression) zu packen. Wenn Sie eine DAC-Kolonne (oder ein Selbstpackgerät) verwenden und diese selbst mit DAISOGEL-Kieselsäure befüllen, ist das Ziel, ein gleichmäßig gepacktes Kieselsäurebett mit der gewünschten Bettlänge zu erhalten. Aufgrund der mechanischen axialen Kompression der DAC-Säulen müssen Sie zunächst die entsprechende Menge an trockenem Silicagel abmessen, bevor Sie die Säule befüllen.

Anwendungen

Welche DAISOGEL-Sorte eignet sich am besten für die Aufreinigung rekombinanter Peptide?

Rekombinante Peptide sind Therapeutika, die mit Hilfe der rekombinanten DNA-Methode hergestellt werden, einer Technik, mit der sehr viel längere und komplexere Peptide produziert werden können. Die Produktion beginnt mit der Fermentation in einem mikrobiellen Wirt, z. B. dem bakteriellen Mikroorganismus E. coli oder einem Mikroorganismus auf Hefebasis wie S. cerevisiae oder, in jüngerer Zeit, der methylotrophen Pichia pastoris. Diese Mikroorganismen werden so manipuliert, dass sie das gewünschte rekombinante Peptid während des Fermentationsprozesses exprimieren. Im Gegensatz zur synthetischen Methode der Peptidproduktion fällt bei der rekombinanten Methode eine erhebliche Menge an Wirtszelltrümmern, glykosylierten Proteinen und anderen Verunreinigungen an, die nach der Ernte entfernt werden müssen. Hinzu kommt,

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Welcher DAISOGEL-Typ eignet sich am besten für die Aufreinigung synthetischer Peptide?

Auch wenn es keine allgemeingültige Antwort gibt, sollten wir zunächst einige Hintergrundinformationen zu den verschiedenen Peptidarten und ihrem Aufbau geben. Im Allgemeinen gibt es zwei vorgelagerte Verfahren für die großtechnische Herstellung von Wirkstoffen auf Peptidbasis: Synthetische Methode: Festphasen-Peptidsynthese (SPPS) unter Verwendung von Aminosäure-Ausgangsstoffen und entweder Boc- oder der milderen Fmoc-Chemie; rekombinante DNA-Methode: rekombinante Produktion aus Mikroorganismenkulturen wie E. coli Peptide, die mit der synthetischen Methode hergestellt werden, sind im Allgemeinen sehr sauber und erfordern im Vergleich zu den rekombinanten Peptiden nicht so viel Aufreinigung. Die rekombinante DNA-Methode ermöglicht die Herstellung von viel längeren und komplexeren Peptiden;