虽然没有一个通用的答案,但让我们先来了解一下不同类型的多肽及其构成的背景。一般来说,大规模生产多肽原料药有两种上游模式:
- 合成方法:固相肽合成 (SPPS),使用氨基酸起始材料和 Boc 或较温和的 Fmoc 化学反应;
- DNA 重组法:从大肠杆菌等微生物培养物中进行重组生产
与重组肽相比,合成法生产的肽通常非常干净,不需要太多的纯化。DNA 重组法可以生产更长、更复杂的多肽;但是,由于重组多肽必须从发酵过程中提取,因此该方法需要额外的下游处理,以达到最终产品的纯度。
然而,今天我们生活在一个革命性的时代,肽的合成有了新的突破;现在可以用更长的氨基酸链安全地合成肽,从而产生更大、更复杂的合成肽。为了纯化这种肽,DAISOGEL 提供了两种理想的硅胶产品系列。
我们最受欢迎的 ODS-RPS
我们最强大的产品是SP-120-10-ODS-RPS,它是反相纯化领域值得信赖的主力产品。这种孔径为 120 Å 的 10 µm 硅胶是我们的标准 C18 相,它的高耐酸性使其成为合成肽纯化中最受欢迎、最经济的选择。如下图所示,使用我们的 ODS-RPS 系列,分子量为 3340 道尔顿的 GLP-1 激动剂 Taspoglutide 的纯度可以达到 95% 以上。

更高分辨率+更高分辨率的 ODS
但是,您可能需要在提高回收率的同时保持纯度。极高价值和/或更复杂的合成肽就可能属于这种情况。在这种情况下,应考虑使用更高等级的 DAISOGEL:SP-100-10-ODS-P。这种 10 µm 硅胶孔径为 100 Å,具有极高的表面积,可确保合成肽纯化过程中的高分离度和高负载能力。如下图所示,使用 ODS-P 系列,塔斯波鲁肽的纯度可达 95%以上,但回收率更高。

多肽的其他注意事项
ODS-P 系列的另一个优点是可自由使用高达 100% 的水基流动相条件,同时仍允许较宽的 pH 容差范围。
如果您的合成肽对于 100 Å P 系列来说太大(分子量大于 5000 道尔顿),那么 RPS 系列更宽的 120 Å 孔径可能更合适。最后,如果您的多肽具有不寻常的长圆形或折叠构象,则可能需要更宽的孔径,为此我们建议使用 200 Å 硅胶:SP-200-10-ODS-RPS。