Produktionsleiter, die für die nachgelagerte Verarbeitung synthetischer oder rekombinanter Peptide verantwortlich sind, wissen sehr gut, dass das CIP einer gepackten Chromatographiesäule ein "notwendiges Übel" ist, um die Lebensdauer des Bettes zu verlängern. CIP ist zwar ein Schritt, den man so weit wie möglich vermeiden möchte, aber es ist auch eine wirtschaftlich wichtige Praxis, die die Kosten für die Herstellung Ihres Wirkstoffs senken kann.
Überlegungen zur Durchführung von CIP bei Säulen, die mit einem Kieselgel mit gebundener Phase gepackt sind
Die erste und wichtigste Überlegung ist das CIP-Mittel, also die zu verwendende Chemikalie. Natürlich ist eine mildere Chemikalie mit einem pH-Wert nahe der Neutralität immer vorzuziehen. Milde Mittel sind jedoch im Allgemeinen nicht geeignet, um Verunreinigungen zu entfernen, die fest an die gebundene Phase gebunden sind. Das Waschen mit organischen Lösungsmitteln kann ebenfalls hilfreich sein, um bestimmte hydrophobe Spezies zu entfernen, aber Lösungsmittel allein führen nicht zu einer tiefen CIP der Säule.
Wenn die "milden" chemischen und "einfachen" Lösungsmitteloptionen nicht ausreichen, um eine angemessene Reinigung und Wiederherstellung der Säulenleistung zu erreichen, ist die letzte Möglichkeit in der Regel eine wässrige NaOH-Lösung in Gegenwart eines organischen Lösungsmittels.
Für das CIP auf NaOH-Basis empfehlen wir Folgendes:
- Verwenden Sie eine möglichst niedrige NaOH-Konzentration, die noch eine ausreichende Reinigung gewährleistet. Höhere NaOH-Konzentrationen verringern die Retentionszeit Ihrer Säule aufgrund des Verlusts von gebundenen Liganden schneller.
Retentionszeit für Naphthalin
Auswirkung der unterschiedlichen NaOH-Konzentration auf die Verkürzung der Retentionszeit der Säule aufgrund des Verlusts gebundener Liganden.
- Führen Sie das NaOH-CIP so selten wie möglich durch, ohne die Leistung der Säule zu beeinträchtigen.
- In ähnlicher Weise sollten Sie die erste CIP-Lauge erst dann einsetzen, wenn so viele Reinigungszyklen durchgeführt wurden, dass die Säulenleistung noch akzeptabel ist. Es kann sein, dass das erste CIP erst nach dem fünften Reinigungszyklus durchgeführt werden muss (oder sogar erst nach dem zehnten Zyklus, wenn Ihre SOP ein CIP nach jeweils fünf Zyklen vorsieht).
- Richten Sie Ihre CIP-Methode nicht nach dem Volumen der NaOH-Lösung, die Sie über die Säule leiten wollen, sondern nach der Kontaktzeit der Kieselsäure mit der NaOH-Lösung.
- Nach dem CIP mit NaOH ist die Säule SOFORT zu neutralisieren, indem das Bett mit einer Lösung mit einem angemessenen sauren pH-Wert gewaschen wird.
- Führen Sie den CIP-Schritt im Rückspül-/Reverse-Flow-Modus durch!
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